Laboratóriá bunkovej kultúry sú navrhnuté tak, aby zabránili mikrobiálnej kontaminácii a škodlivým účinkom, čo vyžaduje čisté laboratórne prostredie, čerstvý vzduch, suché a bezdymové. Laboratórium bunkovej kultúry by preto malo venovať osobitnú pozornosť procesu plánovania a projektovania.
Po prvé, laboratórny dizajn
1. Bunková kultúra je aseptická technika, ktorá vyžaduje, aby pracovné prostredie a podmienky neobsahovali mikrobiálnu kontamináciu a iné škodlivé faktory.
2, zásady bunkovej kultúry a dizajnu majú zabrániť mikrobiálnej kontaminácii a škodlivým faktorom, čo si vyžaduje čisté pracovné prostredie, čerstvý vzduch, suchý a bezdymový prach.
3. Princíp konštrukcie miestnosti na kultiváciu buniek je vo všeobecnosti to, že aseptická prevádzková oblasť je umiestnená vo vnútri miestnosti, kde je miestnosť menej pohyblivá, a bežná prevádzka a uzavretá kultúra sú v jednej miestnosti, ktorá je čistou miestnosťou 100 000 prostredia. Pracie a dezinfekčné práce sa nachádzajú mimo čistej miestnosti, aby sa zabránilo kontaminácii vnútorného prostredia. Čistá miestnosť pre bunky vyžaduje klimatizačný systém a udržuje určitý pozitívny tlak na vonkajšej strane.
4, anatómia laboratórium sa používa predovšetkým na separáciu tkanív orgánov, je potrebné mať aseptický stôl, disekčný mikroskop, rôzne chirurgické vybavenie.
Po druhé, laboratórne vybavenie
1, ultra-čistý pracovný stôl / skrinka na biologickú bezpečnosť
Bunková kultúra musí byť v sterilnom prostredí. Pri uskutočňovaní bunkových experimentov je potrebné, aby sa vykonával vo vzduchu na úrovni 100. Potom musíme kúpiť čistú lavicu alebo biologicky bezpečnú skrinku, ktorá môže poskytnúť 100 úrovní čistoty.
U väčšiny laboratórií je ultra-čistý pracovný stôl plne schopný plniť prevádzkové potreby laboratória. Čo sa týka veľkosti ultra-čistej platformy, záleží na veľkosti laboratória a na počte ľudí, či sa jedná o jedno alebo dvojité, či si chcete kúpiť jednostranné alebo obojstranné a kúpiť niekoľko , Ak je experimentálna prevádzka biologicky nebezpečná, mali by ste si vybrať pokrokovejšiu biologicky bezpečnú skrinku ako ultralehká lavica.
2, inkubátor oxidu uhličitého
Inkubátory oxidu uhličitého boli široko používané vo väčšine komôr bunkovej kultúry. Výhodou inkubátora oxidu uhličitého je, že môže poskytnúť určité množstvo CO2 (obvykle 5%), ktoré je potrebné pre bunkovú kultúru, a je ľahké stabilizovať pH roztoku kultúry a je vhodné pre otvorenú alebo polootvorenú kultúru. ,
3, mikroskop
Invertované mikroskopy sú základným zariadením v každodennej práci laboratórií bunkovej kultúry. Používajú sa hlavne na pochopenie rastu buniek a pozorovanie prítomnosti alebo neprítomnosti znečistenia. Ak to umožňujú finančné prostriedky, odporúča sa použiť vysoko kvalitný fázový kontrastný mikroskop, disekčný mikroskop, fluorescenčný mikroskop, videosystém alebo zariadenie na snímanie s časovým odstupom vybavené kamerovým systémom na zaznamenávanie a zaznamenávanie rastu buniek kedykoľvek.
4, čistá voda stroj / ultra čistý vodný stroj
Bunková kultúra tiež vyžaduje ultračistý vodný systém. Bežná čistá voda a destilovaná voda sa nemôžu použiť na bunkovú kultúru, zatiaľ čo ultračistá voda sa používa hlavne na konfiguráciu určitého média a činidla. Voda ultračistej vody môže byť vodovodná alebo sekundárna. Voda (dobrá kvalita deionizovanej vody, odolnosť asi 10 megohms), okrem ultra-čistej bunkovej kultúry vody, najdôležitejšie endotoxín má prísne požiadavky, takže pri výbere ultra-čistý vodný stroj, je potrebné vybrať ultra-filter komponenty , Model.
5, odstredivka
Bunková kultúra vyžaduje centrifugáciu, aby sa zhromaždili pasážové bunky. Všeobecná rýchlosť otáčania je medzi 1000 a 1500 otáčok za minútu, takže je potrebné zakúpiť nízkoteplotnú centrifugačku s normálnou teplotou a tiež priviesť 10 ml, 50 ml a rotor kultivačnej platne. Na zber bunkových peliet alebo bunkových supernatantov je tiež potrebná vysokorýchlostná chladená odstredivka.
6, nádrž na kvapalný dusík
Na vytvorenie bunkovej banky je potrebná nádrž na kvapalný dusík. Zmrazené bunky v nádrži s kvapalným dusíkom môžu všeobecne zabezpečiť biologickú aktivitu v posledných desiatich rokoch. Čo sa týka veľkosti nádrže na kvapalný dusík, podľa veľkosti bunkovej banky. A nastaviť.
7, nízkoteplotná chladnička
Bunky sa musia skladovať pri teplote -70 až -80 ° C cez noc na konzerváciu zmrazením a potom sa umiestnia do nádrže na kvapalný dusík, ktorá vyžaduje nízkoteplotnú mrazničku.
8, okno prenosu
Bunkový dom by mal byť izolovaný od vonkajšieho sveta, keď je postavený. To si vyžaduje zakúpenie transferového okna na dodanie položky, zníženie možnosti kontaminácie a všetky položky vstupujúce do bunkovej miestnosti sú sterilizované UV-žiarením v prenosovom okne, aby sa zaistila bezpečnosť čistej miestnosti.
9, autokláv
Pred a po použití je potrebné sterilizovať všetky druhy laboratórnych laboratórnych pomôcok. Podmienky sterilizácie sú všeobecne 121 ° C počas 20 až 30 minút. To si vyžaduje autokláv umiestnený v čistej miestnosti, aby sa zabezpečila biologická bezpečnosť.
10, pipetovacia pištoľ, elektrická pipetovacia pištoľ
V bunkovom experimente sú potrebné rôzne špičky a pipety, takže je potrebné konfigurovať pipetu.
11, všetky druhy spotrebného materiálu potrebného v bunkovej kultúre
Rôzne doštičky na kultiváciu buniek, fľaše na kultiváciu buniek, pipetové platničky atď.
12, zvyšok prístroja
Na experimenty s bunkami môžu byť na miešanie kvapalín potrebné aj oscilátory a magnetické miešadlá; niektoré neštiepiteľné nádoby z nehrdzavejúcej ocele alebo sklenených nádob naplnené bunkami vyžadujú pomoc ultrazvukového čističa; ak ide o imunologické pokusy, určite sa vyžaduje ľad. Ak je dopyt po kúpeli a drvenom ľade veľký, musíte si kúpiť stroj na výrobu ľadu. Okrem toho môžu zlomené bunky vyžadovať ultrazvukový rozrušovač buniek. Nakoniec, ak je bunkový dom veľký, musí byť k dispozícii vozík. Kvapalné médiá sú vždy mučivá vec.